Nascido em Lisboa às primeiras horas do dia 7 de Junho de 1502, D. João III foi o segundo filho varão do rei D. Manuel e primogénito do seu segundo casamento com a infanta D. Maria de Castela, filha dos Reis Católicos. Com dezanove anos de idade, em Dezembro de 1521, o príncipe D. João ascendeu ao trono por morte de seu pai, inesperadamente ceifado pela peste, dando início a um dos mais longos reinados da história portuguesa, vindo a falecer em Junho de 1557.
D. João III é um dos reis «mal-amados» da história portuguesa, cuja persona, enquanto homem e rei, havia de ficar irremediavelmente marcada com o acto que estabeleceu o Tribunal da Inquisição no reino, em 1536.
À sua morte, ocorrida em Junho de 1557, foi o seu neto Sebastião, rei-menino de três anos de idade, quem herdou o trono de Portugal.